【摘 要】
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目的 通过观察黄芪、莪术主要有效抗癌成分黄芪总皂苷、莪术醇单独及联合应用体外抑制肿瘤血管生成的作用及其对EGFR/PI3K/AKT和HIF-1α/VEGF信号通路的影响，进一步阐明临床常用配伍黄芪-莪术的抗癌作用机制和内在物质基础。方法 采用CCK8法筛选黄芪总皂苷及莪术醇体外有效浓度，设对照组、黄芪总皂苷组、莪术醇组、两药联合组进行HUVECs细胞体外培养，CCK-8法检测各组细胞增殖抑制率，光
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81673810）；
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目的 通过观察黄芪、莪术主要有效抗癌成分黄芪总皂苷、莪术醇单独及联合应用体外抑制肿瘤血管生成的作用及其对EGFR/PI3K/AKT和HIF-1α/VEGF信号通路的影响，进一步阐明临床常用配伍黄芪-莪术的抗癌作用机制和内在物质基础。方法 采用CCK8法筛选黄芪总皂苷及莪术醇体外有效浓度，设对照组、黄芪总皂苷组、莪术醇组、两药联合组进行HUVECs细胞体外培养，CCK-8法检测各组细胞增殖抑制率，光镜下观察HUVECs细胞体外成血管能力，Westernblot及RT-qPCR法检测EGFR/PI3K/AKT及HIF-1α/VEGF信号通路相关蛋白及其mRNA的表达。结果 干预24 h后，50μmol/L黄芪总皂苷及50μmol/L莪术醇对HUVECs细胞具有较强抑制作用；细胞增殖抑制率分别为黄芪总皂苷组3.06%、莪术醇组3.14%及两药联合组11.75%,两药联合组显著优于单药组（P＜0.01）;体外成血管能力，黄芪总皂苷组、莪术醇组与对照组比较未显示明显差异（P＞0.05）,两药联合组的血管管腔数显著少于对照组、黄芪总皂苷组及莪术醇组（P＜0.01）;各蛋白的表达，黄芪总皂苷组EGFR、PI3K、HIF-1α、VEGF蛋白表达下降，其中EGFR下降尤为显著（P＜0.01）,莪术醇组HIF-1α、VEGF蛋白表达下降明显（P＜0.01）,两药联合组EGFR、PI3K、AKT、HIF-1α、VEGF蛋白表达下降，其中EGFR、PI3K、HIF-1α、VEGF降低尤为显著（P＜0.01）;各mRNA转录，黄芪总皂苷组EGFR、PI3K、AKT、VEGF mRNA表达降低，莪术醇组AKT、HIF-1α、VEGF mRNA表达降低，两药联合组EGFR、PI3K、AKT、HIF-1α、VEGF mRNA表达降低，其中EGFR、PI3K、AKT、VEGF mRNA降低尤为显著（P＜0.01）。结论 黄芪总皂苷和莪术醇可通过抑制EGFR/PI3K/AKT信号通路、HIF-1α/VEGF信号通路EGFR、PI3K、AKT、HIF-1α、VEGF等相关mRNA转录及蛋白表达，进而抑制血管内皮细胞增殖及毛细血管样结构形成，两者联合作用更强，揭示了黄芪-莪术配伍抑制肿瘤血管生成的主要作用靶点及物质基础。
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