【摘 要】
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为建立大丽轮枝菌（Verticillium dahliae）原生质体的制备和再生体系,采用单因素分析法分析了大丽轮枝菌摇培时间、裂解酶浓度、酶解时间和温度、渗透压稳定剂的种类和浓度及pH
【机 构】
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石河子大学农学院农业部西北荒漠绿洲作物有害生物综合治理重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31760497,31560494);农业部西北荒漠绿洲作物有害生物综合治理重点实验室开放课题(KFJJ20170104)
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为建立大丽轮枝菌（Verticillium dahliae）原生质体的制备和再生体系,采用单因素分析法分析了大丽轮枝菌摇培时间、裂解酶浓度、酶解时间和温度、渗透压稳定剂的种类和浓度及pH对原生质体释放的影响;从再生培养基、培养基Agar浓度和酶解时间对原生质体的再生条件进行了优化;并对优化条件下获得的原生质体进行了GFP瞬时表达。结果表明,将分生孢子培养18 h收集菌丝体,以1.2 mol/L的KCl作为渗透压稳定剂,在pH 6.0的条件下,加入10 mg/m L的裂解酶,30℃酶解4 h时,获得的原生质
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