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目的
探讨Yes相关蛋白1(YAP1)在食管癌组织中的表达及其与化疗耐受的关系,以及微小RNA(miRNA,miR)-920在YAP1表达调控中的作用。
方法免疫组织化学检测YAP1在30例食管癌组织及其正常组织中的表达,小干扰RNA(siRNA)干扰技术结合聚合酶链反应(PCR)及四唑氮化合物(MTS)实验在食管癌细胞株中检测YAP1表达与化疗敏感性的关系。流式细胞仪分选食管癌肿瘤干细胞群,结合PCR及Western blot方法检测YAP1在肿瘤干细胞的表达。siRNA干扰技术结合干细胞微球体培养检测YAP1在肿瘤干细胞活性维持中的作用。运用生物信息学软件预测靶向YAP1的miRNAs,同时利用miRNA定量PCR确定候选miRNA的表达差异。转染miRNA模拟物结合Western blot实验验证候选miRNA对YAP1靶向调节作用。最后利用四唑氮化合物(MTS)方法检测miR-920在食管癌化疗中的作用。
结果YAP1在食管癌癌组织中表达(5.300±0.559)明显高于食管正常组织(2.200±0.327,P=0.001),干扰YAP1可增强食管癌化疗敏感性(DDP组:P=0.003,PTX组:P=0.000),YAP1在食管癌肿瘤干细胞群中表达(5.667±0.636)明显高于非干细胞群(1.267±0.176,P=0.002),miR-920在食管癌中表达降低与YAP1表达呈负相关。
结论miR-920可靶向抑制YAP1表达,增强食管癌的化疗敏感性。