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采用新的传代及MMC（Mytomycin-C,MMC）处理方法,以求简化繁琐的饲养层制备过程,对MEF（Mouse embryonic fibroblast,MEF）细胞采用胰酶消化（充分去除多余消化液）后直接接种的方法传代.MEF细胞经MMC处理后,用PBS充分洗去MMC继续培养2-3 h后做饲养层.结果表明：新的传代方法对MEF细胞的增殖及细胞形态无明显影响,新方法制备的饲养层具有促进ES细胞（Embryonic stem cell,ES）增殖以及抑制ES细胞分化的作用,而且得到了典型的ES细胞样集落