燕麦SCoT分子标记体系的优化及引物筛选

来源 :西南农业学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：finallove

【摘要】

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【目的】本研究对影响燕麦目标起始密码子多态性聚合酶链式反应(SCoT-PCR)的4个因素(模板DNA、引物、Mix混合液用量及退火温度)进行了优化,并通过最优体系进行了多态性引物的

【作者】

：

李进陈仕勇

【机构】

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西南民族大学青藏高原研究院,西南民族大学畜牧兽医学院,四川省抗逆牧草种质创新及生态修复工程实验室

【出处】

：

西南农业学报

【发表日期】

：

2021年5期

【关键词】

：

燕麦 SCoT 体系优化引物筛选

【基金项目】

：

国家重点研发计划课题(2017YFC0504806),四川省应用基础项目(2019YJ0253),西南民族大学中央高校基本科研业务费专项优秀学生培养工程项目(2020YYXS65)。

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【目的】本研究对影响燕麦目标起始密码子多态性聚合酶链式反应(SCoT-PCR)的4个因素(模板DNA、引物、Mix混合液用量及退火温度)进行了优化,并通过最优体系进行了多态性引物的筛选。【方法】以4份燕麦品种DNA为模板,采用L₉(3³)正交试验确定模板DNA、引物、Mix混合液用量的最优反应体系,在48~54℃温度范围设置8个梯度进行退火温度筛选,并通过最优体系对80条引物进行了多态性筛选和验证。【结果】优化后的反应体系总体积为20μl,包含2μl模板DNA(

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