真核重组质粒pCDNA3.1-Flag-PTEN和原核重组质粒pGEX-6P-1-GST-PTEN构建

来源 :蚌埠医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：fjfhmtv

【摘要】

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目的:构建人第10号染色体缺失的磷酸酶(PTEN)真核重组质粒pCDNA3.1-Flag-PTEN和原核重组质粒pGEX-6P-1-GST-PTEN,研究PTEN融合质粒生物学效应。方法:根据基因库中PTEN序列,设

【作者】

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柴云于明朱颖

【机构】

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江苏大学附属医院神经内科

【出处】

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蚌埠医学院学报

【发表日期】

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2019年11期

【关键词】

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抑癌蛋白人第10号染色体缺失的磷酸酶真核原核克隆构建重组表达 tumor suppressor protein phosphatase and ten

【基金项目】

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国家自然科学基金资助项目(81601043),镇江市重点研发计划项目(SH2018037)

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目的:构建人第10号染色体缺失的磷酸酶(PTEN)真核重组质粒pCDNA3.1-Flag-PTEN和原核重组质粒pGEX-6P-1-GST-PTEN,研究PTEN融合质粒生物学效应。方法:根据基因库中PTEN序列,设计并合成相关引物。用基因重组技术将目的片段插入pCDNA3.1-Flag和pGEX-6P-1-GST空载质粒中,通过PCR和DNA测序,鉴定插入基因序列。将pCDNA3.1-Flag-PTEN转染到HEK 293细胞,将pGEX-6P-1-GST-PTEN转到E.coli BL-21中,通过W

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