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作者单位：415300 长沙医学院附属石门医院
通讯作者：谢深科
【摘要】 目的 研究Cox-2和Bcl-2在结肠癌及癌前病变中的表达，并探讨其临床意义。方法 采用免疫组织化学方法检测61例结肠腺癌，31例结肠腺瘤，10例正常结肠黏膜，分别进行Cox-2和Bcl-2检测。结果 Cox-2表达在正常结肠黏膜、腺瘤及腺癌中阳性表达率逐渐增强，分别为20%、41.93%、69.84%。三种病变阳性表达率两两比较，差异有统计学意义（P<0.05）；Cox-2表达强度与组织分级呈负相关（P<0.05）；Bcl-2阳性率分别为腺癌76.19%和腺瘤中74.19%，两者比较差异无统计学意义（P<0.05）。阳性表达强度腺癌明显高于腺瘤（P<0.05），在正常结肠黏膜阳性表达率为20%，明显低于腺瘤和腺癌组织表达率，差异有统计学意义（P<0.05）。Cox-2与Bcl-2表达呈正相关。结论 根据Cox-2与Bcl-2表达正相关性分析，Cox-2的表达增高可能诱导Bcl-2的表达，二者协同作用与结肠癌的发生、发展起重要作用。
【关键词】 结肠癌； 癌前病变； Cox-2； Bcl-2； 免疫组织化学
结肠癌是消化道常见恶性肿瘤，发病率呈逐年上升趋势，在我国结肠癌平均死亡年龄为60.08岁，其中男性为59.29岁，女性为61.05岁，死亡性别比1.35，男性高于女性。结肠腺瘤是常见的癌前病变，是发展为癌的最危险因素。溃疡性结肠炎亦与结肠癌的发生有一定关系。Cox-2（环氧化酶-2）是诱导性表达基因，在静止细胞中不易检测到，病理条件下产生的Cox-2和蛋白质可以检测到，如在直结肠癌，肺癌、食管癌、前列腺癌、乳腺癌和卵巢癌等肿瘤中均有表达。Bcl-2是重要的细胞凋亡调节分子，在肿瘤的发生发展中起着重要作用。
1 资料与方法
1.1 一般资料 取2009年8月～2010年12月长沙医学院附属石门县人民医院病理科已经确诊的结肠癌标本61例，腺瘤31例，正常结肠黏膜10例，其中高分化腺癌18例，中分化腺癌24例，低分化腺癌19例。
1.2 方法 标本经4%甲醛固定，常规HE染色。免疫组化采用SP法,常规设置阴阳性对照。CD抗体及SP试剂盒均购自上海太阳生物科技有限公司。根据染色反应程度、着色范围和分布特点进行综合判断，分别0～++++，++～++++为强阳性。随机观察10个视野，阳性细胞数<10%为阴性（-表示）；30%≥阳性细胞数>10%为轻度阳性～阳性（+表示）；60%≥阳性细胞数>30%为中度阳性（++表示）；阳性细胞数>60%为强阳性（+++表示）。
1.3 统计学分析 采用SPSS 11.0统计软件，率的比较采用检χ2检验。相关性分析用Spearmen相关分析法。P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 Cox-2胞膜或者胞浆阳性表达，63例结肠癌中（+）4例，（++）8例，（+++）32例，表达率为69.84%；31例腺瘤中（+）5例，（++）8例，（+++）2例，表达率41.93%；10例正常结肠黏膜（+）1例，（++）1例，表达率为20%，三者比较差异有统计学意义（P<0.05）。Cox-2在高分化腺癌中表达强度明显低于低分化腺癌表达强度（P<0.05）。Cox-2在61例腺癌高分化组阳性表达率为66.66%（12/18）；中分化组阳性表达率为79.16%（19/24）；低分化组阳性表达率为89.47%（17/19）。Cox-2在高分化腺癌中表达强度明显低于的低分化腺癌强度（P<0.05）。
2.2 Bcl-2胞膜或者胞浆阳性表达，63例结肠癌中（+）4例，（++）9 例，（+++）35例，表达率为76.19%；31例腺瘤（+）8例，（++）13例，（+++）2例，表达率74.19%；10例正常结肠黏膜（+）1例，（++）1例，表达率为20%。腺癌与腺瘤的阳性表达率基本相同，腺癌的阳性表达强度明显高于腺瘤（P<0.05）。二者的阳性表达率及表达强度与正常结肠黏膜比较，差异有统计学意义（P<0.05）。Bcl-2在61例腺癌高分化组阳性表达率为72.22%（13/18）；中分化组阳性表达率为87.50%（21/24）；低分化组阳性表达率为73.68%（14/19），组织分级与阳性表达率无显著性差异（P>0.05）。
3 讨论
环氧化酶（Cyclooxygenase,Cox）可以通过催化精氨琥珀酸合成环内过氧化物而形成前列腺素，具有两种异构体形式Cox-1和Cox-2。Cox-2是一种诱导型酶。目前认为是免疫调节研究中的一种理想标记物和炎症性疾病的治疗靶标。在多种癌前病变及恶性肿瘤组织中表达高水平［1］，Bcl-2是凋亡研究中最受重视的癌基因之一，它是B细胞淋巴瘤/白血病（B cell lymphoma leukemia-2, Bcl-2）基因的缩写形式，它可能与凋亡基因bax拮抗，抑制细胞色素C对caspase蛋白酶的激活，另外它可以促进谷胱甘肽进入细胞核，进而阻止caspase蛋白酶的活动，抑制细胞凋亡［2］，在多种肿瘤研究中，Bcl-2的表达与肿瘤的分级、分期和预后的相关性报道不一［3］。本组实验表明，Cox-2在结肠癌发生的早期开始表达增加，Cox-2的高表达提示结肠腺癌恶性程度高，预后差，因而Cox-2可能成为一个新的肿瘤治疗的靶标。本组实验表明，Bcl-2在正常结肠黏膜组织、结肠腺瘤组织及结肠癌组织均有表达，腺瘤和腺癌组织阳性表达率无明显差异性，腺癌表达强度明显高于腺瘤阳性表达强度，结肠腺瘤及腺癌阳性表达强度和阳性表达率均明显高于正常结肠黏膜，具有统计学意义（P<0.05）。综合上述，Cox-2可能诱导Bcl-2的表达增高，Bcl-2介导通路可能是Cox-2防止凋亡中下游信号通路之一。本组实验表明，Cox-2与Bcl-2表达呈正相关，Cox-2的表达增高可能诱导Bcl-2的表达，二者协同作用，促进了结肠腺癌的发生，从而在结肠组织恶性转化中起到重要作用。
参 考 文 献
［1］ Dannenberg AJ，Altorki NK,Bovle JO, et al. Cyclo-ox ygenase 2:apharmacological target for the prevention of cancer.Lancet On-col,2001,2（9）:544-551.
［2］ Frydenberg M, Foo TMS, Jones AS, et al. Benign prostatic hyper-plasiavideo image analysis and its relationship to androgen and epidermal growth factor receptor expression.J Urol,2001,146:872.
［3］ PM De Angelis, TS Tokke, LT Horstensen, et al. Apoptosis and expression of BAX, and association with p53 genotype/phenotype.Curr Cancer Drug Targets,2004,4（1）:65.
（收稿日期：2011-03-02）
（本文编辑：郎威）
通讯作者：谢深科
【摘要】 目的 研究Cox-2和Bcl-2在结肠癌及癌前病变中的表达，并探讨其临床意义。方法 采用免疫组织化学方法检测61例结肠腺癌，31例结肠腺瘤，10例正常结肠黏膜，分别进行Cox-2和Bcl-2检测。结果 Cox-2表达在正常结肠黏膜、腺瘤及腺癌中阳性表达率逐渐增强，分别为20%、41.93%、69.84%。三种病变阳性表达率两两比较，差异有统计学意义（P<0.05）；Cox-2表达强度与组织分级呈负相关（P<0.05）；Bcl-2阳性率分别为腺癌76.19%和腺瘤中74.19%，两者比较差异无统计学意义（P<0.05）。阳性表达强度腺癌明显高于腺瘤（P<0.05），在正常结肠黏膜阳性表达率为20%，明显低于腺瘤和腺癌组织表达率，差异有统计学意义（P<0.05）。Cox-2与Bcl-2表达呈正相关。结论 根据Cox-2与Bcl-2表达正相关性分析，Cox-2的表达增高可能诱导Bcl-2的表达，二者协同作用与结肠癌的发生、发展起重要作用。
【关键词】 结肠癌； 癌前病变； Cox-2； Bcl-2； 免疫组织化学
结肠癌是消化道常见恶性肿瘤，发病率呈逐年上升趋势，在我国结肠癌平均死亡年龄为60.08岁，其中男性为59.29岁，女性为61.05岁，死亡性别比1.35，男性高于女性。结肠腺瘤是常见的癌前病变，是发展为癌的最危险因素。溃疡性结肠炎亦与结肠癌的发生有一定关系。Cox-2（环氧化酶-2）是诱导性表达基因，在静止细胞中不易检测到，病理条件下产生的Cox-2和蛋白质可以检测到，如在直结肠癌，肺癌、食管癌、前列腺癌、乳腺癌和卵巢癌等肿瘤中均有表达。Bcl-2是重要的细胞凋亡调节分子，在肿瘤的发生发展中起着重要作用。
1 资料与方法
1.1 一般资料 取2009年8月～2010年12月长沙医学院附属石门县人民医院病理科已经确诊的结肠癌标本61例，腺瘤31例，正常结肠黏膜10例，其中高分化腺癌18例，中分化腺癌24例，低分化腺癌19例。
1.2 方法 标本经4%甲醛固定，常规HE染色。免疫组化采用SP法,常规设置阴阳性对照。CD抗体及SP试剂盒均购自上海太阳生物科技有限公司。根据染色反应程度、着色范围和分布特点进行综合判断，分别0～++++，++～++++为强阳性。随机观察10个视野，阳性细胞数<10%为阴性（-表示）；30%≥阳性细胞数>10%为轻度阳性～阳性（+表示）；60%≥阳性细胞数>30%为中度阳性（++表示）；阳性细胞数>60%为强阳性（+++表示）。
1.3 统计学分析 采用SPSS 11.0统计软件，率的比较采用检χ2检验。相关性分析用Spearmen相关分析法。P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 Cox-2胞膜或者胞浆阳性表达，63例结肠癌中（+）4例，（++）8例，（+++）32例，表达率为69.84%；31例腺瘤中（+）5例，（++）8例，（+++）2例，表达率41.93%；10例正常结肠黏膜（+）1例，（++）1例，表达率为20%，三者比较差异有统计学意义（P<0.05）。Cox-2在高分化腺癌中表达强度明显低于低分化腺癌表达强度（P<0.05）。Cox-2在61例腺癌高分化组阳性表达率为66.66%（12/18）；中分化组阳性表达率为79.16%（19/24）；低分化组阳性表达率为89.47%（17/19）。Cox-2在高分化腺癌中表达强度明显低于的低分化腺癌强度（P<0.05）。
2.2 Bcl-2胞膜或者胞浆阳性表达，63例结肠癌中（+）4例，（++）9 例，（+++）35例，表达率为76.19%；31例腺瘤（+）8例，（++）13例，（+++）2例，表达率74.19%；10例正常结肠黏膜（+）1例，（++）1例，表达率为20%。腺癌与腺瘤的阳性表达率基本相同，腺癌的阳性表达强度明显高于腺瘤（P<0.05）。二者的阳性表达率及表达强度与正常结肠黏膜比较，差异有统计学意义（P<0.05）。Bcl-2在61例腺癌高分化组阳性表达率为72.22%（13/18）；中分化组阳性表达率为87.50%（21/24）；低分化组阳性表达率为73.68%（14/19），组织分级与阳性表达率无显著性差异（P>0.05）。
3 讨论
环氧化酶（Cyclooxygenase,Cox）可以通过催化精氨琥珀酸合成环内过氧化物而形成前列腺素，具有两种异构体形式Cox-1和Cox-2。Cox-2是一种诱导型酶。目前认为是免疫调节研究中的一种理想标记物和炎症性疾病的治疗靶标。在多种癌前病变及恶性肿瘤组织中表达高水平［1］，Bcl-2是凋亡研究中最受重视的癌基因之一，它是B细胞淋巴瘤/白血病（B cell lymphoma leukemia-2, Bcl-2）基因的缩写形式，它可能与凋亡基因bax拮抗，抑制细胞色素C对caspase蛋白酶的激活，另外它可以促进谷胱甘肽进入细胞核，进而阻止caspase蛋白酶的活动，抑制细胞凋亡［2］，在多种肿瘤研究中，Bcl-2的表达与肿瘤的分级、分期和预后的相关性报道不一［3］。本组实验表明，Cox-2在结肠癌发生的早期开始表达增加，Cox-2的高表达提示结肠腺癌恶性程度高，预后差，因而Cox-2可能成为一个新的肿瘤治疗的靶标。本组实验表明，Bcl-2在正常结肠黏膜组织、结肠腺瘤组织及结肠癌组织均有表达，腺瘤和腺癌组织阳性表达率无明显差异性，腺癌表达强度明显高于腺瘤阳性表达强度，结肠腺瘤及腺癌阳性表达强度和阳性表达率均明显高于正常结肠黏膜，具有统计学意义（P<0.05）。综合上述，Cox-2可能诱导Bcl-2的表达增高，Bcl-2介导通路可能是Cox-2防止凋亡中下游信号通路之一。本组实验表明，Cox-2与Bcl-2表达呈正相关，Cox-2的表达增高可能诱导Bcl-2的表达，二者协同作用，促进了结肠腺癌的发生，从而在结肠组织恶性转化中起到重要作用。
参 考 文 献
［1］ Dannenberg AJ，Altorki NK,Bovle JO, et al. Cyclo-ox ygenase 2:apharmacological target for the prevention of cancer.Lancet On-col,2001,2（9）:544-551.
［2］ Frydenberg M, Foo TMS, Jones AS, et al. Benign prostatic hyper-plasiavideo image analysis and its relationship to androgen and epidermal growth factor receptor expression.J Urol,2001,146:872.
［3］ PM De Angelis, TS Tokke, LT Horstensen, et al. Apoptosis and expression of BAX, and association with p53 genotype/phenotype.Curr Cancer Drug Targets,2004,4（1）:65.
（收稿日期：2011-03-02）
（本文编辑：郎威）