猪沙波病毒抗体间接ELISA检测方法的建立及初步应用

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以原核表达重组蛋白作为抗原建立了猪沙波病毒(SaV)抗体的间接ELISA检测方法.使用矩阵滴定法确定抗原包被浓度为6.4μg/mL,血清稀释倍数为1∶50.试验选用1% BSA作为封闭液,血清和二抗的最佳作用时间分别为60 min和40 min.选择无致癌的TMB为底物,确定TMB最佳反应时间为10 min.通过对20份猪阴性血清样品的检测,计算阳性判定值为0.203.通过交叉试验、批内和批间重复性试验证明,本研究建立的SaV间接ELISA检测方法具有特异性高,重复性好的特点,可用于猪沙波病毒抗体的检测.
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