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摘要：目的 建立心欣颗粒中红景天苷的含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法，以Diamonsil C18（4.6 mm×250 mm，5 ?m）为色谱柱，乙腈-0.1%磷酸（7∶93）为流动相，流速1.0 mL/min，检测波长223 nm。结果 红景天苷在0.106 4～1.596 ?g范围内样品含量与峰面积呈良好的线性关系；重复性RSD=1.17%（n=6）；平均回收率为98.53%，RSD=1.05%（n=5）。结论 本方法稳定、可靠、灵敏度高、重复性好，操作简便易行，可用于心欣颗粒的质量控制。
关键词：心欣颗粒；红景天苷；高效液相色谱法；含量测定
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2012.06.019
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2012）06-0051-02
心欣颗粒是石家庄市华新药业有限责任公司自主研发的中药新药。本品由红景天、枸杞子、沙棘等中药组成，具有益气养阴、活血化痰等功效。为有效控制产品质量，我们采用高效液相色谱法（HPLC）对处方中君药红景天的主要成分红景天苷含量进行测定，现报道如下。
1 仪器与试药
Agilent 1100型高效液相色谱仪；SHIMADZU UV-2550紫外分光光度计；sartoriusBP211D电子天平；autoscience AS5150A超声波清洗器。
红景天苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号110818- 200404）；心欣颗粒（自制，批号050901、050902、050903、051004、051005、051006）；乙腈为色谱纯；其他化学试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：Diamonsil C18（4.6 mm×250 mm，5 ?m）色谱柱；流动相：乙腈-0.1%磷酸（7∶93）；流速：1.0 mL/min；检测波长：223 nm；进样量：5 ?L。理论板数按红景天苷峰计不低于3 000。
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品溶液的制备 取红景天苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含0.1 mg的溶液，即得。
2.2.2 供试品溶液的制备 取装量差异项下的本品，研细，取约0.15 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10 mL，密塞，称定重量，超声处理（180 W，40 kHz）30 min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.2.3 阴性对照溶液的制备 取不含红景天的阴性对照样品，按供试品溶液制备方法制得。
2.3 线性关系考察
分别精密吸取红景天苷对照品溶液（0.106 4 mg/mL）1、2、5、10、15 ?L注入液相色谱仪中，测定，以红景天苷进样量为横坐标，相应峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，得线性方程Y=1 333.924 2X+6.132 669 1，r=0.999 95。表明进样量在0.106 4～1.596 ?g范围内线性关系良好。
2.4 系统适用性试验
分别精密吸取红景天苷对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液各5 ?L，在上述色谱条件下进行测定，色谱图见图1。
2.5 精密度试验
精密吸取同一供试品溶液5 ?L，连续进样6次，测定红景天苷峰面积，平均值为666.472 2，RSD=0.22%。结果表明，本方法精密度良好。
2.6 稳定性试验
取同一供试品溶液，依法分别于0、2、4、8、16 h测定红景天苷峰面积，平均值为666.3188，RSD=0.25%。表明本品溶液在16 h内稳定。
2.7 重复性试验
取同一批号（050901）样品6份，分别按供试品溶液制备方法制成样品溶液并测定，红景天苷平均含量为6.473 0 mg/g， RSD=1.17%。结果表明，方法重复性良好。
2.8 加样回收率试验
称取已知含量的样品约0.75 g，精密称定。精密加入红景天苷对照品溶液10 mL（0.049 mg/mL），依法测定，结果见表1。红景天苷的平均回收率为98.53%，RSD=1.05%。表明本法回收率较好，准确度较高。
2.9 样品测定
依正文方法测定6批样品，结果表明心欣颗粒中的红景天苷的含量基本稳定，考虑到大生产过程中可能会有波动，故规定每袋（1 g/袋）含红景天苷以C14H20O7计，不得少于5 mg/袋。
3 讨论
取红景天苷对照品溶液，于200～400 nm进行扫描，结果红景天苷在223 nm波长处强吸收峰，因此，选定223 nm为检测波长。
含量测定中选择色谱条件时，曾对流动相包括溶剂系统组成和比例进行了探索研究，根据文献[1-3]对多种溶剂系统进行了选择，根据分离情况，最后选择乙腈-0.1%磷酸（7∶93）为流动相，流速1 mL/min。
在进行样品预处理时，分别采用水、甲醇、乙醇为溶剂，分别超声30 min，测定提取液中红景天苷的含量，结果表明，甲醇提取率最高，因此最终选择甲醇为提取溶剂。对超声时间进行优选时，分别超声20、30、40 min，测定提取液中红景天苷的含量，结果表明，超声30 min红景天苷基本提取完全，因此最终选择超声30 min。
参考文献：
[1] 吴少雄，柳陈坚，郭亚东，等.HPLC法测定复方红景天胶囊中红景天苷的含量[J].云南中医中药杂志，2008，29（6）：52-53.
[2] 宋兴发，尚强，高山.红景天养生片中红景天苷的含量测定[J].医药导报，2009，28（12）：1629-1630.
[3] 宋薇，石晓峰，张瑞堂，等.HPLC法测定复方红景天口含片中红景天苷和酪醇的含量[J].中国药房，2011，22（7）：621-622.
（收稿日期：2011-12-08，编辑：陈静）
关键词：心欣颗粒；红景天苷；高效液相色谱法；含量测定
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2012.06.019
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2012）06-0051-02
心欣颗粒是石家庄市华新药业有限责任公司自主研发的中药新药。本品由红景天、枸杞子、沙棘等中药组成，具有益气养阴、活血化痰等功效。为有效控制产品质量，我们采用高效液相色谱法（HPLC）对处方中君药红景天的主要成分红景天苷含量进行测定，现报道如下。
1 仪器与试药
Agilent 1100型高效液相色谱仪；SHIMADZU UV-2550紫外分光光度计；sartoriusBP211D电子天平；autoscience AS5150A超声波清洗器。
红景天苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号110818- 200404）；心欣颗粒（自制，批号050901、050902、050903、051004、051005、051006）；乙腈为色谱纯；其他化学试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：Diamonsil C18（4.6 mm×250 mm，5 ?m）色谱柱；流动相：乙腈-0.1%磷酸（7∶93）；流速：1.0 mL/min；检测波长：223 nm；进样量：5 ?L。理论板数按红景天苷峰计不低于3 000。
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品溶液的制备 取红景天苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含0.1 mg的溶液，即得。
2.2.2 供试品溶液的制备 取装量差异项下的本品，研细，取约0.15 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10 mL，密塞，称定重量，超声处理（180 W，40 kHz）30 min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.2.3 阴性对照溶液的制备 取不含红景天的阴性对照样品，按供试品溶液制备方法制得。
2.3 线性关系考察
分别精密吸取红景天苷对照品溶液（0.106 4 mg/mL）1、2、5、10、15 ?L注入液相色谱仪中，测定，以红景天苷进样量为横坐标，相应峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，得线性方程Y=1 333.924 2X+6.132 669 1，r=0.999 95。表明进样量在0.106 4～1.596 ?g范围内线性关系良好。
2.4 系统适用性试验
分别精密吸取红景天苷对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液各5 ?L，在上述色谱条件下进行测定，色谱图见图1。
2.5 精密度试验
精密吸取同一供试品溶液5 ?L，连续进样6次，测定红景天苷峰面积，平均值为666.472 2，RSD=0.22%。结果表明，本方法精密度良好。
2.6 稳定性试验
取同一供试品溶液，依法分别于0、2、4、8、16 h测定红景天苷峰面积，平均值为666.3188，RSD=0.25%。表明本品溶液在16 h内稳定。
2.7 重复性试验
取同一批号（050901）样品6份，分别按供试品溶液制备方法制成样品溶液并测定，红景天苷平均含量为6.473 0 mg/g， RSD=1.17%。结果表明，方法重复性良好。
2.8 加样回收率试验
称取已知含量的样品约0.75 g，精密称定。精密加入红景天苷对照品溶液10 mL（0.049 mg/mL），依法测定，结果见表1。红景天苷的平均回收率为98.53%，RSD=1.05%。表明本法回收率较好，准确度较高。
2.9 样品测定
依正文方法测定6批样品，结果表明心欣颗粒中的红景天苷的含量基本稳定，考虑到大生产过程中可能会有波动，故规定每袋（1 g/袋）含红景天苷以C14H20O7计，不得少于5 mg/袋。
3 讨论
取红景天苷对照品溶液，于200～400 nm进行扫描，结果红景天苷在223 nm波长处强吸收峰，因此，选定223 nm为检测波长。
含量测定中选择色谱条件时，曾对流动相包括溶剂系统组成和比例进行了探索研究，根据文献[1-3]对多种溶剂系统进行了选择，根据分离情况，最后选择乙腈-0.1%磷酸（7∶93）为流动相，流速1 mL/min。
在进行样品预处理时，分别采用水、甲醇、乙醇为溶剂，分别超声30 min，测定提取液中红景天苷的含量，结果表明，甲醇提取率最高，因此最终选择甲醇为提取溶剂。对超声时间进行优选时，分别超声20、30、40 min，测定提取液中红景天苷的含量，结果表明，超声30 min红景天苷基本提取完全，因此最终选择超声30 min。
参考文献：
[1] 吴少雄，柳陈坚，郭亚东，等.HPLC法测定复方红景天胶囊中红景天苷的含量[J].云南中医中药杂志，2008，29（6）：52-53.
[2] 宋兴发，尚强，高山.红景天养生片中红景天苷的含量测定[J].医药导报，2009，28（12）：1629-1630.
[3] 宋薇，石晓峰，张瑞堂，等.HPLC法测定复方红景天口含片中红景天苷和酪醇的含量[J].中国药房，2011，22（7）：621-622.
（收稿日期：2011-12-08，编辑：陈静）