紫花苜蓿ISSR—PCR反应体系的建立与优化

来源 :草地学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：supergirl4

【摘要】

：

通过优化影响紫花苜蓿（Medicago sativa L．）ISSR—PCR的主要参数，建立适于紫花苜蓿的ISSR反应体系和扩增程序。在20μL体系中各反应物的最适含量为：15ng模板DNA，0．2mmol／LdNTP，0．4μmol

【作者】

：

王瑜袁庆华

【机构】

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中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

【出处】

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草地学报

【发表日期】

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2007年3期

【关键词】

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紫花苜蓿 ISSR PCR反应体系优化 Alfalfa ISSR PCR reaction system Optimization

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通过优化影响紫花苜蓿（Medicago sativa L．）ISSR—PCR的主要参数，建立适于紫花苜蓿的ISSR反应体系和扩增程序。在20μL体系中各反应物的最适含量为：15ng模板DNA，0．2mmol／LdNTP，0．4μmol／LISSR引物，0．8U Taq DNA聚合酶，2μL 10×PCR Buffer，1．5mmol／L MgCl2，2．5％去离子甲酰胺。PCR扩增程序为：94℃预变性4min，94℃变性30s，62℃（62℃～58℃）退火45s，72℃延伸1min45s，共11

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