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摘 要：建立反相高效液相色谱法测定刺五加胶囊中紫丁香苷的含量。方法：采用奥泰公司C18色谱柱（220mm×4.6mm，5μm），乙腈-甲醇-0.1mol/L醋酸溶液（10∶15∶75）为流动相，检测波长为265nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃。紫丁香苷在1～32μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。紫丁香苷平均回收率分别为99.6%。结论：本法简便、准确，可用于刺五加胶囊中紫丁香苷的含量测定。
关键词：刺五加胶囊；含量；测定
刺五加胶囊具有益气健脾，补肾安神功效。刺五加胶囊常用于脾肾阳虚、体虚乏力、食欲不振、失眠多梦等。刺五加在中国医药学中做为药物广泛应用已有悠久的历史，具有补肾强腰、益气安神、活血通络的功效。《药性论》记载：“能破逐恶风血，四肢不遂，贼风伤人，软脚，暨腰，主多年瘀血在皮肌，治痹湿内不足，主虚赢，小儿三岁不能行。”刺五加具有免疫调节、抗肿瘤、抗辐射、抗应激、耐缺氧、抗衰老等药理作用[1-6]。本文采用高效液相法对刺五加胶囊中的紫丁香苷的进行了含量测定。
1 仪器与试药
1.1 仪器：VWR天平防震垫（北京慧龙环科环境仪器有限公司）；JJ-BF 0.001g天平（上海仁沃实业发展有限公司）；YLC1620A高效液相色谱仪（河南郑州南北仪器设备有限公司）；RU超纯水机（上海同田生物技术有限公司）；长城狮鼎SHB-III型台式循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）；Milli-Q Direct水纯化系统（上海力晶科学仪器有限公司）；DX-208恒温水浴槽（北京长流科学仪器有限公司）；天星进样瓶清洗机TX-500型（北京天星科仪科技有限公司）。
1.2 色谱柱：奥泰公司C18色谱柱（220mm×4.6mm，5μm）。
1.3 对照品：紫丁香苷。
1.4 试剂：醋酸钠（北京市津同乐泰化工产品有限公司）、冰醋酸（北京市津同乐泰化工产品有限公司）、甲醇（北京市津同乐泰化工产品有限公司）、三乙胺（昆山诺普森实验室用品科技有限公司）、磷酸二氢铵（北京市津同乐泰化工产品有限公司）、乙腈（北京市津同乐泰化工产品有限公司）。
1.5 试药：刺五加胶囊
2 测定方法确定
2.1 色谱条件
依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下。流动相：乙腈-甲醇-0.1mol/L醋酸溶液（10∶15∶75）为流动相，检测波长：265nm，流速：1.0m·min-1。柱温：30℃。理论板数按紫丁香苷峰计算应不得低于2500。
2.2 对照品溶液的制备
取在60℃减压干燥4小时的紫丁香苷对照品适量，精密称定，加流动相制成每lml含5μg的溶液，即得。
2.3 供试品溶液的制备
取本品内容物适量，精密称定，加15毫升甲醇溶液超声处理0.5小时，放冷，滤过，滤液置25ml量瓶中，用少量甲醇溶液分次洗涤容器和残渣，洗液滤人同一量瓶中，加甲醇溶液至刻度，摇匀，即得。
2.4 精密度试验
精密称取紫丁香苷对照品适量，加流动相使溶解，制成浓度为5μg·mL-1的供试品溶液。照上述色谱条件，精密吸取10μl，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.66%，表明本方法精密度良好。
2.5 对照品的线性考察
精密称取适量紫丁香苷对照品，加入流动相溶液使溶解分别配制成每毫升含1、2、4、8、16、32微克的溶液。分别精密上述溶液吸取10μL，注人液相色谱仪，依照2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线。结果表明，紫丁香苷在1～32μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
2.6 重现性试验
称取同一批的紫丁香苷样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.91%，结果表明此方法的重现性良好。
2.7 准确度试验
取对照品适量，精密称取已知含量的样品9份，置量瓶中，分别精密加入紫丁香苷对照品，按项下方法制备成80%、100%、120%。取模拟样品照“ 含量测定”项下方法试验，计算回收率为99.6%，RSD为0.88%。
2.8 样品含量测定
3 讨论
分别考察甲醇-0.03mol·L-1醋酸铵（60∶40），乙腈-甲醇-0.1mol/L醋酸溶液（25∶15∶60），甲醇-水（45∶55），乙腈-水（15∶85），乙腈-0.1%甲酸水（20∶80），乙腈-甲醇-0.1mol/L醋酸溶液（10∶15∶75）不同比例的流動相，结果以乙腈-甲醇-0.1mol/L醋酸溶液（10∶15∶75）为流动相为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用乙腈-甲醇-0.1mol/L醋酸溶液（10∶15∶75）为流动相为流动相。本实验采用高效液相法效果好、方法简便、快捷、准确、专属性好，可用于刺五加胶囊中紫丁香苷的含量测定。
参考文献
[1]倪劲松，吴家祥，肖纫秋，石博，王心蕊，刘淑香.刺五加皂甙对糖尿病大鼠血过氧化脂质和超氧化物歧化酶的影响[J].白求恩医科大学学报，1998（01）.
[2]石学魁，王雅贤，严基东，张晓莉，唐小云，宋宝辉，鞠宝玲.刺五加总黄酮和针刺对脑缺血后TGF-β1的影响[J].牡丹江医学院学报，2006（06）.
[3]战术，张文杰，钟国赣，刘伟，江岩，邵春杰.刺五加叶皂甙单体Sb对培养大鼠心肌细胞动作电位的影响[J].白求恩医科大学学报，1995（01）.
[4]战术，钟国赣，安刚，孙成文，曾庆华，孙晓霞，邵春杰，徐景达.刺五加叶皂苷单体Sc3对培养大鼠心肌细胞自发性搏动及动作电位的影响[J].中国药学杂志，1996（07）.
[5]翟春梅，孟永海，王欣慰，王知斌，依古拉斯A·凯恩，田振坤.刺五加叶纯化物对2型糖尿病大鼠降血糖、降血脂作用的实验研究[J].中国医学创新，2016（05）.
[6]姜红玉，睢大员，于晓风，曲绍春，徐华丽，王志才，陈燕萍.刺五加叶皂苷对实验性脑缺血大鼠血液流变学及血小板功能的影响[J].吉林大学学报（医学版），2004（03）.
关键词：刺五加胶囊；含量；测定
刺五加胶囊具有益气健脾，补肾安神功效。刺五加胶囊常用于脾肾阳虚、体虚乏力、食欲不振、失眠多梦等。刺五加在中国医药学中做为药物广泛应用已有悠久的历史，具有补肾强腰、益气安神、活血通络的功效。《药性论》记载：“能破逐恶风血，四肢不遂，贼风伤人，软脚，暨腰，主多年瘀血在皮肌，治痹湿内不足，主虚赢，小儿三岁不能行。”刺五加具有免疫调节、抗肿瘤、抗辐射、抗应激、耐缺氧、抗衰老等药理作用[1-6]。本文采用高效液相法对刺五加胶囊中的紫丁香苷的进行了含量测定。
1 仪器与试药
1.1 仪器：VWR天平防震垫（北京慧龙环科环境仪器有限公司）；JJ-BF 0.001g天平（上海仁沃实业发展有限公司）；YLC1620A高效液相色谱仪（河南郑州南北仪器设备有限公司）；RU超纯水机（上海同田生物技术有限公司）；长城狮鼎SHB-III型台式循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）；Milli-Q Direct水纯化系统（上海力晶科学仪器有限公司）；DX-208恒温水浴槽（北京长流科学仪器有限公司）；天星进样瓶清洗机TX-500型（北京天星科仪科技有限公司）。
1.2 色谱柱：奥泰公司C18色谱柱（220mm×4.6mm，5μm）。
1.3 对照品：紫丁香苷。
1.4 试剂：醋酸钠（北京市津同乐泰化工产品有限公司）、冰醋酸（北京市津同乐泰化工产品有限公司）、甲醇（北京市津同乐泰化工产品有限公司）、三乙胺（昆山诺普森实验室用品科技有限公司）、磷酸二氢铵（北京市津同乐泰化工产品有限公司）、乙腈（北京市津同乐泰化工产品有限公司）。
1.5 试药：刺五加胶囊
2 测定方法确定
2.1 色谱条件
依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下。流动相：乙腈-甲醇-0.1mol/L醋酸溶液（10∶15∶75）为流动相，检测波长：265nm，流速：1.0m·min-1。柱温：30℃。理论板数按紫丁香苷峰计算应不得低于2500。
2.2 对照品溶液的制备
取在60℃减压干燥4小时的紫丁香苷对照品适量，精密称定，加流动相制成每lml含5μg的溶液，即得。
2.3 供试品溶液的制备
取本品内容物适量，精密称定，加15毫升甲醇溶液超声处理0.5小时，放冷，滤过，滤液置25ml量瓶中，用少量甲醇溶液分次洗涤容器和残渣，洗液滤人同一量瓶中，加甲醇溶液至刻度，摇匀，即得。
2.4 精密度试验
精密称取紫丁香苷对照品适量，加流动相使溶解，制成浓度为5μg·mL-1的供试品溶液。照上述色谱条件，精密吸取10μl，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.66%，表明本方法精密度良好。
2.5 对照品的线性考察
精密称取适量紫丁香苷对照品，加入流动相溶液使溶解分别配制成每毫升含1、2、4、8、16、32微克的溶液。分别精密上述溶液吸取10μL，注人液相色谱仪，依照2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线。结果表明，紫丁香苷在1～32μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
2.6 重现性试验
称取同一批的紫丁香苷样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.91%，结果表明此方法的重现性良好。
2.7 准确度试验
取对照品适量，精密称取已知含量的样品9份，置量瓶中，分别精密加入紫丁香苷对照品，按项下方法制备成80%、100%、120%。取模拟样品照“ 含量测定”项下方法试验，计算回收率为99.6%，RSD为0.88%。
2.8 样品含量测定
3 讨论
分别考察甲醇-0.03mol·L-1醋酸铵（60∶40），乙腈-甲醇-0.1mol/L醋酸溶液（25∶15∶60），甲醇-水（45∶55），乙腈-水（15∶85），乙腈-0.1%甲酸水（20∶80），乙腈-甲醇-0.1mol/L醋酸溶液（10∶15∶75）不同比例的流動相，结果以乙腈-甲醇-0.1mol/L醋酸溶液（10∶15∶75）为流动相为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用乙腈-甲醇-0.1mol/L醋酸溶液（10∶15∶75）为流动相为流动相。本实验采用高效液相法效果好、方法简便、快捷、准确、专属性好，可用于刺五加胶囊中紫丁香苷的含量测定。
参考文献
[1]倪劲松，吴家祥，肖纫秋，石博，王心蕊，刘淑香.刺五加皂甙对糖尿病大鼠血过氧化脂质和超氧化物歧化酶的影响[J].白求恩医科大学学报，1998（01）.
[2]石学魁，王雅贤，严基东，张晓莉，唐小云，宋宝辉，鞠宝玲.刺五加总黄酮和针刺对脑缺血后TGF-β1的影响[J].牡丹江医学院学报，2006（06）.
[3]战术，张文杰，钟国赣，刘伟，江岩，邵春杰.刺五加叶皂甙单体Sb对培养大鼠心肌细胞动作电位的影响[J].白求恩医科大学学报，1995（01）.
[4]战术，钟国赣，安刚，孙成文，曾庆华，孙晓霞，邵春杰，徐景达.刺五加叶皂苷单体Sc3对培养大鼠心肌细胞自发性搏动及动作电位的影响[J].中国药学杂志，1996（07）.
[5]翟春梅，孟永海，王欣慰，王知斌，依古拉斯A·凯恩，田振坤.刺五加叶纯化物对2型糖尿病大鼠降血糖、降血脂作用的实验研究[J].中国医学创新，2016（05）.
[6]姜红玉，睢大员，于晓风，曲绍春，徐华丽，王志才，陈燕萍.刺五加叶皂苷对实验性脑缺血大鼠血液流变学及血小板功能的影响[J].吉林大学学报（医学版），2004（03）.