【摘 要】
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目的对人干扰素-α2b（hIFN-α2b）基因的5′端进行突变,构建重组人干扰素-α2b（rhIFN-α2b）原核高表达工程菌,以提高rhIFN-α2b的表达水平。方法依据大肠杆菌密码子偏好性,在不改
【机 构】
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安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室,安徽安科生物工程集团股份有限公司,安徽大学生命科学学院
【基金项目】
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国家“重大新药创制”科技重大专项（编号：2008ZX09203-003）
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目的对人干扰素-α2b（hIFN-α2b）基因的5′端进行突变,构建重组人干扰素-α2b（rhIFN-α2b）原核高表达工程菌,以提高rhIFN-α2b的表达水平。方法依据大肠杆菌密码子偏好性,在不改变hIFN-α2b的氨基酸序列的情况下,定点突变hIFN-α2b基因5′端序列并PCR扩增出rhIFN-α2b′,克隆至温控型表达载体pJW2,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性重组子,温度诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE、Western blot鉴定分析并以WISH-VSV系统检测其抗病毒活性。结果SDS
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