5-氮杂-2′-脱氧胞苷联合曲古抑菌素A对人胃癌细胞的存活率及E-cadherin甲基化的影响

来源 :中华老年医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong421
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目的 探讨5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-dC)联合曲古抑菌素A(TSA)对分化程度不同的人胃腺癌细胞株MKN-45、SGC-7901与MGC-803的细胞存活率和抑癌基因E-cadherin启动子区甲基化以及mRNA表达的影响. 方法 培养3个细胞株,实验分为空白对照组、5-Aza-dC组(10μmol/L 5-Aza-dC处理72 h)、TSA组(1μmol/L TSA处理48 h)和联合组(10μmol/L5-Aza-dC处理24 h后,再加入1μmol/L TSA处理48 h).观察三株细胞形态的改变,用台盼蓝染色法检测活细胞数.采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测3株细胞的E-cadherin基因启动子区甲基化水平与mRNA表达. 结果 MKN-45细胞中,5-Aza-dC组、TSA组与联合组的细胞存活率分别为(73.03±1.92)%、(64.48±1.28)%和(52.44±1.45)%;SGC-7901细胞分别是(63.33±1.92)%、(52.15±1.44)%和(44.44±1.45)%;MGC-803细胞分别是(57.33±1.61)%、(45.48±1.29)%和(33.11±1.12)%.3株细胞的单药组的细胞存活率均减少,联合组分别比5-Aza-dC和TSA处理组明显下降(均P<0.05).E-cadherin基因启动子区甲基化水平,5-Aza-dC组、TSA组及联合组的甲基化产物与空白对照组相比较均降低,其中联合组比单药组降低明显.空白对照、5-Aza-dC、TSA及二者联合处理组的E-cadherin的mRNA相对表达量在MKN-45细胞株中分别为0.17±0.01、0.32±0.01、0.29±0.02和0.57±0.02;在SGC-7901细胞株中分别为0.22±0.01、0.46±0.01、0.43±0.01和0.61±0.01;在MGC-803细胞株中分别为0.24±0.02、0.49±0.01、0.44±0.01和0.73±0.01.在单药处理组中比空白对照组升高(P<0.05),并且二药联合组比单药组升高(P<0.01). 结论 5-Aza-dC和TSA单独处理均降低分化程度不同的胃癌细胞存活率,使E-cadherin基因的甲基化水平下降,并增加其mRNA表达.3株细胞的联合组的影响效果更明显,两药之间具有协同作用.其中MKN-45的存活率,甲基化水平和mRNA表达的改变均较SGC-7901与MGC-803明显。

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