人源温和气单胞菌溶血素基因的克隆与表达

来源 :河北师范大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：liongliong543

【摘要】

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根据GenBank报道的人源温和气单胞菌溶血素（hly）基因序列设计引物，经PCR扩增，得到大小约为1470 bp的阳性产物.利用BamHⅠ，HindⅢ位点将hly基因片段克隆到pMD19-T载体，构建得到重组

【作者】

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武斌于宙亮于珊水小溪宋杰赵宝华

【机构】

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河北师范大学生命科学学院

【出处】

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河北师范大学学报：自然科学版

【发表日期】

：

2008年2期

【关键词】

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温和气单胞菌溶血素基因克隆表达 Aeromonas sobria hemolysin cloning expression

【基金项目】

：

河北省自然科学基金（C2007000263）

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根据GenBank报道的人源温和气单胞菌溶血素（hly）基因序列设计引物，经PCR扩增，得到大小约为1470 bp的阳性产物.利用BamHⅠ，HindⅢ位点将hly基因片段克隆到pMD19-T载体，构建得到重组质粒pWT-hly，并比较所克隆基因序列的同源性.然后将该基因克隆到原核表达载体pET-28a，构建原核重组表达质粒pWET-hly，转化BL21（DE3）并进行SDS-PAGE分析.结果表明：克隆的hly基因与GenBank报道的溶血素基因同源性为96.19%；重组菌株经IPTG诱导后，hly基因

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