ER β1基因及其剪切变异体真核表达载体的构建与鉴定

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目的应用基因克隆技术构建雌激素受体B1(ERβ1)及其5-8外显子缺失变异体ERβ△5-8(文中简称ERβ△),为ERβ功能的研究奠定基础。方法组织中提取总RNA,RT—PCR法扩增基因ERp1及ERβ△,限制性酶切并克隆于以带EGFP绿色荧光基因及Myc报告基因的非融合真核细胞表达质粒IRES2-EGFP,菌群转化扩增后琼脂糖凝胶电泳,限制性酶切后行DNA测序鉴定。结果PCR扩增及限制性酶切法证实重组真核表达质粒的构建成功。测序表明ERβ1长度为1593bp,ERβ△长度为972bp,与GeneBank
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