玉米淀粉合成酶基因GBSS启动子的克隆与鉴定

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以玉米自交系‘18红’的基因组DNA为模板采用PCR技术对玉米淀粉合成酶基因GBSS(ZmGBSS)的启动子进行克隆,获得了1 884 bp的扩增片段(PZmGBSS),应用启动子分析软件Plant CARE进行分析,发现该片段含有多个不同的调控元件。通过半定量RT-PCR分析表明,在授粉15 d的胚乳中ZmGBSS的表达量最高,其次为胚,在根和叶中的表达量较低。通过不同诱导培养基对胚乳进行培养,发现脱落酸(ABA)诱导后ZmGBSS的表达量明显提高,葡萄糖和赤霉素(GA)诱导后的表达量有所降低。通过构建启动子PZmGBSS瞬时表达载体,并利用基因枪对不同受体进行转化分析,结果发现胚乳中PZmGBSS的启动活性最高,其次为胚,根和叶中最弱。对转化后的胚乳进行诱导培养,发现ABA诱导可使报告基因LUC的表达明显增强。以上结果表明,启动子PZmGBSS为胚乳特异启动子且能够被ABA正向调控。
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