通过工艺优化确定Novozym 435催化酮洛芬酯化拆分的适宜条件为:酰基受体正丙醇与反应介质异辛烷体积比为1∶9、酮洛芬质量浓度20 mg/mL、反应温度30℃、转速200 r/min,24 h后反应的转化率和产物对映体过量值(eep)分别为580%和782%。研究表明:丁二酸酐和顺丁烯二酸酐修饰的Novozym 435对正丙醇的耐受性获得显著提升,正丙醇在反应体系中与异辛烷的体积比可分别达到3∶7和2∶8,同时底物酮洛芬浓度可分别提高到40和80 mg/mL。而且,添加剂的加入能进一步改善酶的催化性能,反应20 h后,丁二酸酐修饰的Novozym 435在以β环糊精为添加剂时,转化率及ee_p值为486%和812%;经顺丁烯二酸酐修饰的Novozym 435在以PEG为添加剂时的转化率和ee_p值为489%和801%。