【摘 要】
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目的探讨caspase-12表达变化与内质网应激介导小鼠原代肝细胞凋亡的关系.方法原位消化灌流法分离小鼠原代肝细胞,应用毒胡萝卜素对小鼠原代肝细胞进行凋亡诱导,通过DNA梯带,H
【机 构】
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200025,上海交通大学医学院附属瑞金医院感染科
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目的探讨caspase-12表达变化与内质网应激介导小鼠原代肝细胞凋亡的关系.方法原位消化灌流法分离小鼠原代肝细胞,应用毒胡萝卜素对小鼠原代肝细胞进行凋亡诱导,通过DNA梯带,Hoechst染色和流式细胞仪等对肝细胞凋亡进行定性和定量检测,选出合适的诱导浓度和诱导时间.用Western印迹法检测凋亡过程中caspase-12蛋白酶的表达变化.结果毒胡萝卜素4 μmol、诱导30 h可引起50%肝细胞发生凋亡,并出现典型的凋亡形态改变.随诱导时间延长procaspase-12蛋白表达逐渐减少.结论毒胡萝卜素4 μmol作用30 h是建立小鼠原代肝细胞凋亡模型的合适条件,随凋亡细胞数量增加,procaspase-12相应减少,caspase-12活化是毒胡萝卜素引起内质网应激介导肝细胞凋亡的主要机制.
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