背景:间充质干细胞来源外泌体与间充质干细胞本身具有相似的功能,但外泌体释放的调控机制依然不是很清楚。目的:探讨中性鞘磷脂酶抑制剂GW4869对骨髓间充质干细胞来源外泌体释放的抑制作用及其对细胞增殖的影响。方法:将骨髓间充质干细胞分为正常对照组,GW4869处理24 h组和GW4869撤药24 h组(GW4869预处理24 h,撤药后继续培养24 h),分别收集各组条件培养基,采用超速离心法提取外泌体,Western blot法鉴定外泌体表面标志蛋白CD63、TSG101的表达,Nano-sight检测外泌体粒径分布及浓度,BCA法测定外泌体总蛋白水平,活细胞成像系统观察GW4869对骨髓间充质干细胞增殖的影响。结果与结论:(1)Western blot显示外泌体阳性表达标志蛋白CD63、TSG101;(2)纳米示综分析证实释放的外泌体大小约114 nm;(3)与正常对照组相比,GW4869处理24 h组和GW4869撤药24 h组外泌体释放减少差异有显著性意义(P<0.01),而GW4869预处理24 h组和GW4869撤药24 h组差异无显著性意义(P>0.05);(4)与正常对照组相比,GW4869及其溶剂二甲基亚砜对骨髓间充质干细胞增殖影响差异无显著性意义(P>0.05);(5)结果表明,GW4869可以显著抑制骨髓间充质干细胞外泌体的释放,并且在撤药24 h内依然保持抑制作用,GW4869对骨髓间充质干细胞增殖无影响。