【摘 要】
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为了高效制备抗冻肽，研究一种丝胶抗冻肽目的基因＆加在大肠杆菌BL21菌株中的重组表达，并分析表达产物的抗冻活性。首先合成SerD基因片段，经KpnI和XhoI双酶切后定向插入质粒载体Pe
【机 构】
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上海交通大学农业与生物学院,福州大学生物科学与工程学院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31471623,21276154);十三五国家重点研发计划专项课题(2016YFD0400206)
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为了高效制备抗冻肽，研究一种丝胶抗冻肽目的基因＆加在大肠杆菌BL21菌株中的重组表达，并分析表达产物的抗冻活性。首先合成SerD基因片段，经KpnI和XhoI双酶切后定向插入质粒载体Pet32α中，构建表达质粒Pet32a-SerD，然后电转化入大肠杆菌B121（DE3），在IPTG诱导下进行目的基因表达，利用镍琼脂糖亲和层析对目的重组蛋白进行纯化，并对其进行抗冻活性分析。结果表明，最佳表达条件为重组菌在20℃诱导16h；通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（Sodium Dodecyl Sulphate
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