【摘 要】
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将表达类志贺毒素II型变异体B亚单位融合蛋白的菌株ppSLT-IIeB在含氨苄青霉素的2×YTA培养基中培养,至对数生长期时加入IPTG诱导,诱导的重组菌超声波裂解后,经聚丙烯酰胺凝胶
【机 构】
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中华人民共和国苏州出入境检验检疫局,扬州大学畜牧兽医学院
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将表达类志贺毒素II型变异体B亚单位融合蛋白的菌株ppSLT-IIeB在含氨苄青霉素的2×YTA培养基中培养,至对数生长期时加入IPTG诱导,诱导的重组菌超声波裂解后,经聚丙烯酰胺凝胶电泳证明其已表达融合蛋白.用谷胱苷肽活化的Sepharose 4 B亲和层析柱纯化融合蛋白,测定纯化蛋白的浓度,免疫BALB/C小鼠,细胞融合后经ELISA检测,得到一株阳性杂交瘤细胞,命名为7C3-1,制备的单抗腹水ELISA效价为210,Western blet结果表明此单抗仅与融合蛋白反应,而与载体蛋白不反应.利用此单抗检测18株水肿病菌株,发现有13株产类志贺毒素II型变异体.
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