评价亚低温对心脏停博复苏猪脑组织钙调蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)与细胞自噬的影响。
方法健康雄性白猪21头，体重33～40 kg，采用随机数字表法分为3组：假手术组(S组，n＝5)、心脏停博复苏组(CA-CPR组，n＝8)和亚低温组(H组，n＝8)。CA-CPR组和H组建立心脏停搏复苏模型。右股动、静脉分别置入Swan-Ganz导管监测胸主动脉血压、右房压、体温及采集血标本。右颈外静脉置入诱颤电极至右心室，经电极释放1 mA交流电诱发心室颤动，室颤诱发成功后，停止机械通气8 min，然后开始心肺复苏。心肺复苏2.5 min时，静脉注射肾上腺素20 μg/kg，此后每3 min重复1次。复苏5 min时，予以电除颤，判断自主循环。若自主循环未恢复，立即心肺复苏2 min，然后电除颤1次。复苏成功后继续机械通气30 h。H组复苏成功后5 min时，利用体表控温毯将体温降至33 ℃，维持至复苏后24 h，后以1 ℃/h复温5 h；其余2组用体表控温毯维持体温37.5～38.5 ℃。于复苏后1、6、12、24和30 h(T1-5)时经股静脉采集血样，采用ELISA法检测血清NSE和S100β蛋白的浓度；随后随机处死5头猪，取大脑皮层组织，采用Western blot法检测CaMKⅡ、微管相关蛋白1轻链3 Ⅱ(LC3Ⅱ)和p62的表达水平。于复苏后48、72和96 h时(T6-8)，CA-CPR组和H组余下3头猪进行神经功能缺损评分。
结果与S组比较，CA-CPR组和H组T1-5时血清NSE和S100β蛋白浓度升高，脑组织CaMKⅡ和LC3Ⅱ表达上调、p62表达下调(P<0.05)；与CA-CPR组比较，H组T3-5时血清NSE和S100β蛋白浓度降低，T6-8时神经功能缺损评分下降，脑组织CaMKⅡ和LC3Ⅱ表达下调、p62表达上调(P<0.05)。
结论亚低温减轻猪心脏停搏复苏后脑损伤的机制可能与抑制CaMKⅡ激活和减轻自噬水平有关。