探讨微小RAN(miR)-451靶向巨噬细胞游走抑制因子(MIF)对甲状腺癌细胞增殖、凋亡的影响及机制。
方法反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测甲状腺癌组织及滤泡状(PTC-133)、乳头状(K1)及未分化(8505C)甲状腺癌细胞株中miR-451的mRNA表达；miR-NC、miR-451模拟物(mimics)、miR-451抑制物(inhibitor)转染K1甲状腺癌细胞，Western blot检测MIF蛋白表达，3组共转染组miR-NC＋miR-451、Wt-MIF＋miR-451 mimics、Mut-MIF＋miR-451 mimics转染K1甲状腺癌细胞，检测荧光素酶活性，以此证实MIF是否为miR-451靶基因；后续实验分为miR-NC、miR-451 mimics、miR-451 mimics＋pcDNA3.1-MIF及miR-NC＋pcDNA3.1-MIF 4组，各组细胞培养48 h后，细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测细胞增殖，流式细胞仪检测细胞凋亡，Western blot检测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Cleaved Caspase-3)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达。
结果甲状腺癌组织中miR-451的mRNA表达( 0.889±0.367)显著低于癌旁组织(6.214±0.884)(t＝28.883，P＝0.004)，甲状腺癌细胞中K1细胞的表达最低，选择作为后续研究；MIF是miR-451的靶基因；与miR-NC组比较PI3K(0.562±0.051)；p-Akt(0.134±0.022)；Cleaved Caspase-3(0.052±0.014)；细胞凋亡率(5.16±0.77)%，miR-451 mimics和miR-451 mimics ＋pcDNA3.1-MIF组PI3K(0.133±0.021、0.223±0.026)、p-Akt(0.034±0.011、0.062±0.013)蛋白表达显著降低(与miR-451 mimics组比较：tPI3K＝30.157，P＝0.003；tp-Akt＝46.626，P＝0.001。
结论MIF是miR-451的靶基因，miR-451可通过靶向MIF抑制PI3K/Akt信号通路抑制K1甲状腺癌细胞增殖及促进细胞凋亡。