【摘 要】
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目的制备并鉴定NPM1单克隆抗体。方法利用纯化的NPM1融合蛋白作为抗原,通过常规的细胞融合技术制备杂交瘤细胞,用间接ELISA法筛选能出产生抗NPM1单克隆抗体的阳性细胞株,对抗
【机 构】
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吉林大学中日联谊医院检验科,佳木斯大学附属第一医院基本外科,
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目的制备并鉴定NPM1单克隆抗体。方法利用纯化的NPM1融合蛋白作为抗原,通过常规的细胞融合技术制备杂交瘤细胞,用间接ELISA法筛选能出产生抗NPM1单克隆抗体的阳性细胞株,对抗NPM1单克隆抗体的特性进行分析。结果筛选出1株产生抗NPM1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,产生的抗体为IgG1亚类,效价达1:720000;纯化后经SDS-PAGE显示两条蛋白条带,纯度达95%以上,相对分子质量约为50000和25000,与单一抗体重链、轻链分子大小相符。免疫组化证实,纯化的2G7抗NPM1单克隆抗体可检测出NPM1在结直肠癌表达,阳性位点为细胞核。结论制备的抗NPM1单克隆抗体可用于NPM1蛋白功能的研究与临床检测。
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