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目的
评价缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在七氟醚预处理减轻大鼠皮质神经元凋亡中的作用。
方法新生SD大鼠，培养原代皮质神经元，以1×106个/ml的密度接种于6孔板(2 ml/孔)，采用随机数字表法，分为4组(n＝15)：正常对照组(C组)、缺氧复氧组(A/R组)、七氟醚预处理组(SP组)和HIF-1α抑制剂2-甲氧基雌二醇组(H组)。采用氧糖缺失90 min，复氧复糖24 h的方法制备皮质神经元缺氧复氧损伤模型；SP组通入2.0%七氟醚2 h，随后采用PBS洗涤3次，每次5 min，结束后立即制备缺氧复氧损伤模型；H组加入5 μmol/L 2-甲氧基雌二醇孵育72 h时进行七氟醚预处理。采用膜联蛋白Ⅴ/碘化丙啶双染流式细胞术检测神经元凋亡情况，采用免疫蛋白印迹法测定神经元Bid、Bim、Puma和活化的caspase-3的表达水平。
结果与C组比较，A/R组神经元凋亡率升高，Bid、Bim、Puma和活化的caspase-3表达上调(P<0.05)；与A/R组比较，SP组和H组神经元凋亡率降低，SP组Bid、Bim、Puma和活化的caspase-3表达下调(P<0.05)；与SP组比较，H组神经元凋亡率升高，Bid、Bim、Puma和活化的caspase-3表达上调(P<0.05)。
结论HIF-1α介导了七氟醚预处理减轻大鼠神经元凋亡的过程，其机制与下调Bid、Bim和Puma表达有关。