【摘 要】
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目的构建日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30单链抗体(scFv)基因.方法通过PCR方法体外扩增并经测序验证的重链、轻链可变区(VH、VL)基因先后重组入原核表达质粒pTHA90相应的位
【机 构】
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南京医科大学医学分子生物学研究所,中国科学院遗传研究所
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目的构建日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30单链抗体(scFv)基因.方法通过PCR方法体外扩增并经测序验证的重链、轻链可变区(VH、VL)基因先后重组入原核表达质粒pTHA90相应的位点上,中间通过一连接肽(Gly4Ser)3基因连接构建成单链抗体基因(scFv),连接产物转化相应受体菌Top10,提取质粒,酶切鉴定重组克隆.表达产物经ELISA方法测定活性.结果重组克隆经酶切鉴定可见预期大小的片段,表明重组成功.表达产物经ELISA检测,OD492值为1.06,高于阴性对照3倍以上,证实具有与相应抗原
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