基于CRISPR/Cas9技术的烟草CPS2基因敲除及功能分析

来源 :烟草科技 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ouwenliao

【摘要】

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为明确柯巴基焦磷酸合酶基因(CPS2)的功能和调控机制,利用CRISPR/Cas9技术对高香气烤烟品系8306中的CPS2基因进行定向编辑,得到了7株靶位点单碱基A/T/C插入的转化植株。利用q

【作者】

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张思琦何佳贺凌霄薛刚孙聚涛李晓辉段杜薇徐世晓

【机构】

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河南农业大学烟草学院,河南中烟工业有限责任公司

【出处】

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烟草科技

【发表日期】

：

2020年5期

【关键词】

：

烟草 CRISPR/Cas9 CPS2 冷杉醇基因编辑 GGPP TobaccoCRISPR/Cas9CPS2cis-AbienolGene editingG

【基金项目】

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国家烟草专卖局科技项目“河南豫浓香型优质烤烟品种筛选与配套技术的应用研究”(No201841000270035)

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为明确柯巴基焦磷酸合酶基因(CPS2)的功能和调控机制,利用CRISPR/Cas9技术对高香气烤烟品系8306中的CPS2基因进行定向编辑,得到了7株靶位点单碱基A/T/C插入的转化植株。利用q-PCR技术分析转化植株二萜类关键基因的表达,并利用GC/MS分析叶面分泌物成分及香叶基香叶基焦磷酸(GGPP)含量(质量分数)。结果表明:①T0代转化植株CPS2及ABS表达量显著降低,冷杉醇和赖百当烯二醇含量也显著降低。②DXR表达量均显著升高,GGPP含量也大幅提高。③CYC-1和CYP71D16表达量差异较

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