论文部分内容阅读
以pET28a为起始质粒，构建高表达DnaB split intein的重组质粒。将质粒pVmut上的编码Intc—dnaB—N—IntN片段克隆至pET28a，得到表达载体pEV．在T7启动子的作用下可使融合DnaB split intein大量表达；并在split intein介导下发生催化DnaB—N的剪接反应，生成环化的DnaB—N蛋白。将合成的包含随机编码5肽的大小为115bp的片段插入质粒pEVDnaB—N位置，转化大肠杆菌后得到一个编码含有6肽（含5个随机氨基酸和1个Cys）的包含约10^3