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目的建立测定补血生发丸中2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷含量的反相高效液相色谱法。方法采用Hypersil ODS C18色谱柱(250mm×4.0mm,5μm),流动相:乙腈-水(17∶83);流速:1.0mL·min-1;检测波长:320nm;柱温:30℃。结果二苯乙烯苷在0.0352~0.352μg线性关系良好(r=0.9999);平均回收率为98.2%(n=6)。结论该方法操作简便、快速,适用于补血生发丸中二苯乙烯苷的含量测定。