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目的
探讨人牙髓间充质干细胞来源外泌体(hDPSC-exosomes)对脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)刺激的小鼠树突状细胞(dendritic cells，DC)成熟和功能的影响，评价其对免疫系统的调节作用。
方法原代培养成人恒牙牙髓间充质干细胞，并提取细胞培养基中的外泌体，透射电镜观察其形态及粒径，Western blot检测其表面CD9、CD63的表达。分别用PBS、LPS、LPS＋hDPSC-exosomes刺激小鼠骨髓来源的树突状细胞(DC2.4)，24 h后采用流式细胞仪检测其表面共刺激分子的表达，ELISA检测细胞因子的分泌水平，RT-PCR方法检测其TLR2、TLR4和NF-κB的mRNA表达水平，混合淋巴细胞反应(MLR)检测hDPSC-exosomes对DC功能的影响。
结果成功分离成人恒牙牙髓间充质干细胞，其表面高表达CD73、CD90，低表达CD45，hDPSC-exosomes电镜下呈圆形或椭圆微囊小体，直径50～80 nm，其表面标志CD9、CD63表达阳性。hDPSC-exosomes能显著降低LPS刺激后DC表面共刺激分子CD11c和CD86的表达；增加TGF-β降低IL-4的表达水平；同时，hDPSC-exosomes能显著抑制LPS诱导的DC促淋巴细胞增殖的能力；与空白对照组相比，hDPSC-exosomes能促进DC表面TLR2、TLR4 mRNA的表达，上调NF-κB mRNA的表达。
结论本实验结果表明，hDPSC-exosomes能抑制小鼠DC的活化和功能成熟，通过TLR-NF-κB信号通路，促使其向耐受型DC方向发展，诱导免疫耐受调节免疫平衡。