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通过引物定点突变PCR法,扩增了猪肺炎支原体(Mhp)168株黏附因子P97基因抗原决定簇R1区基因片段,并将该基因片段插入表达载体pET-32a(+)中构建重组质粒,再将该重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3).DNA序列分析结果表明所构建的重组质粒含有正确的目的基因.经0.1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)37 ℃诱导4 h,重组质粒表达的目的蛋白量可达到总蛋白的23%.Western blotting和ELISA试验结果证明所表达的重组蛋白具有猪肺炎支原体抗原性.