【摘 要】
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目的 探究microRNA-206(miR-206)对胰腺癌细胞放疗敏感性的影响.方法 通过2 Gy照射胰腺癌细胞(AsPC-1、Capan-2、PL45、PANC-1),以人类正常胰腺上皮细胞(HPNE)作为对照,荧光定量聚合酶链反应(qPCR)实验观察细胞中miR-206的表达量;细胞克隆实验检测过表达miR-206对PANC-1细胞存活率的影响,流式细胞术分析其凋亡率;在线软件Targetscan预测miR-206的靶基因,双荧光素酶报告基因验证miR-206与序列相似性家族83成员(FAM83)A
【机 构】
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南阳市中心医院消化内科一病区,河南 南阳 473000
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目的 探究microRNA-206(miR-206)对胰腺癌细胞放疗敏感性的影响.方法 通过2 Gy照射胰腺癌细胞(AsPC-1、Capan-2、PL45、PANC-1),以人类正常胰腺上皮细胞(HPNE)作为对照,荧光定量聚合酶链反应(qPCR)实验观察细胞中miR-206的表达量;细胞克隆实验检测过表达miR-206对PANC-1细胞存活率的影响,流式细胞术分析其凋亡率;在线软件Targetscan预测miR-206的靶基因,双荧光素酶报告基因验证miR-206与序列相似性家族83成员(FAM83)A的靶向关系;过表达/敲低miR-206对FAM83A蛋白水平的影响;Western印迹检测共转染过表达miR-206和FAM83A对FAM83A蛋白及β-catenin、细胞周期蛋白(Cyclin)D1蛋白水平的影响.结果 miR-206在放射照射的胰腺癌多种细胞系中表达量显著降低(P<0.05);过表达miR-206显著促进其凋亡(P<0.05);FAM83A是miR-206的直接靶基因;miR-206可负反馈调节FAM83A表达量;共转染过表达miR-206和FAM83A可显著逆转miR-206对FAM83A蛋白水平的抑制作用,恢复其对PANC-1细胞存活分数的抑制、凋亡促进作用,改善miR-206对Wnt/β-catenin信号通路的抑制作用.结论 miR-206靶向抑制FAM83A表达影响Wnt/β-catenin信号通路的活性,从而介导胰腺癌PANC-1细胞的放疗敏感性.
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