牛共刺激分子CD80、CD86 SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立

来源 :中国奶牛 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lollipop7919

【摘要】

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本研究旨在建立一种共刺激分子CD80、CD86 SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法。根据GenBank中牛CD80、CD86的基因序列设计特异性引物,采用RT-PCR方法扩增牛CD80、CD86目的片段

【作者】

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唐颖邓宇

【机构】

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西昌学院动物科学学院

【出处】

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中国奶牛

【发表日期】

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2020年6期

【关键词】

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荧光定量PCR CD80 CD86 Fluorescence quantitative PCRCD80CD86

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本研究旨在建立一种共刺激分子CD80、CD86 SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法。根据GenBank中牛CD80、CD86的基因序列设计特异性引物,采用RT-PCR方法扩增牛CD80、CD86目的片段,将其克隆到pMD18-T载体上,提取阳性质粒进行测序鉴定,用得到的阳性重组质粒作为标准品,优化SYBR GreenⅠ荧光定量PCR反应条件,建立其标准曲线,对建立的方法进行特异性、重复性、敏感性试验。结果显示,所建立的方法特异性、稳定性良好,较敏感,可用于牛共刺激分子CD80、CD86的快速检测

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