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采用高效液相色谱法建立了虫草酒中虫草素含量的测定方法，探讨了色谱柱类型、流动相组成、柱温以及检测波长对分析结果的影响。研究表明：当色谱柱为Waters Symmetry C18柱（150mm×4．6mmi．d．，5μm）：流动相为乙腈-水（体积比为10：90），流速为1ml／min；检测波长258nm；柱温40℃：进样量5μl时分离、检测效果最佳，此法操作简便，样品只需用0．45um微孔滤膜过滤处理，线性范围宽、重现性好、精密度高，效果令人满意，对于虫草酒的生产和质量检测都具有现实的指导意义。