探讨微小核糖核酸－21(miRNA－21)对过氧化氢(H₂O₂)诱导的C－kit^＋心脏干细胞凋亡的作用及其机制。

采用酶消化法结合免疫磁珠分选法培养C－kit^＋心脏干细胞，然后将C－kit^＋心脏干细胞分为对照组(将miRNA－21模拟物阴性对照转染至C－kit^＋心脏干细胞48 h)、模拟物组(将miRNA－21模拟物转染至C－kit^＋心脏干细胞48 h)、对照＋ H₂O₂组(将miRNA－21模拟物阴性对照转染至C－kit^＋心脏干细胞48 h后，以100 μmol H₂O₂处理2 h)和模拟物＋ H₂O₂组 (将miRNA－21模拟物转染至C－kit^＋心脏干细胞48 h后，以100 μmol H₂O₂处理2 h)。采用RT－PCR检测各组miRNA－21的mRNA表达水平；采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况；采用Western blot检测各组促凋亡相关蛋白(Caspase－3和Bax)和抗凋亡蛋白(Bcl－2)的蛋白表达水平。

(1)模拟物组的miRNA－21 mRNA表达水平高于对照组(P<0.05); 对照＋H₂O₂组的miRNA－21 mRNA表达水平低于对照组(P<0.05)；模拟物＋ H₂O₂ 组的miRNA－21表达水平低于模拟物组，而高于对照＋H₂O₂组(P均<0.05)。(2)对照组与模拟物组的细胞早期凋亡率差异无统计学意义[(4.57±3.45)%比(5.13±3.21)%，P>0.05]；对照＋H₂O₂组细胞早期凋亡率高于对照组[(79.07±5.75)%比(4.57±3.45)%，P<0.05]; 模拟物＋H₂O₂组细胞早期凋亡率高于模拟物组[(30.27±1.36)%比(5.13±3.21)%，P<0.05]，而低于对照＋H₂O₂组[(30.27±1.36)%比(79.07±5.75)%，P<0.05]。(3)对照组与模拟物组的Caspase－3、Bax和Bcl－2的蛋白表达水平差异均无统计学意义(P均>0.05)；对照＋H₂O₂组Caspase－3和Bax的蛋白表达水平均高于对照组(P均<0.05)，两组之间的Bcl－2蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)；模拟物＋ H₂O₂ 组的Caspase－3和Bax蛋白表达水平均低于对照＋H₂O₂组(P均<0.05)，而Bcl－2的蛋白表达水平高于对照＋H₂O₂组(P<0.05)。

过表达miRNA－21可通过降低细胞内促凋亡相关蛋白表达和提高抗凋亡蛋白表达，减轻氧化应激所致C－kit^＋心脏干细胞凋亡。