【摘 要】
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目的 确定反相高效液相色谱法(reversed-phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC)测定稻米氨基酸含量最适柱前衍生化时间.方法 以氨基酸标准品以及稻米氨基酸提取物为对象,对柱前衍生化时间与氨基酸检测结果之间的关系进行研究.结果 邻苯二甲醛(O-phthalaldehyde,OPA)和3-巯基丙酸与氨基酸的衍生化反应进行到15 min时,氨基酸的峰面积达到最大值,不同OPA-氨基酸衍生化产物的稳定性存在很大的差异.在15～300 min的
【机 构】
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农业农村部产地环境污染防控重点实验室, 农业农村部环境保护科研监测所, 天津 300191
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目的 确定反相高效液相色谱法(reversed-phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC)测定稻米氨基酸含量最适柱前衍生化时间.方法 以氨基酸标准品以及稻米氨基酸提取物为对象,对柱前衍生化时间与氨基酸检测结果之间的关系进行研究.结果 邻苯二甲醛(O-phthalaldehyde,OPA)和3-巯基丙酸与氨基酸的衍生化反应进行到15 min时,氨基酸的峰面积达到最大值,不同OPA-氨基酸衍生化产物的稳定性存在很大的差异.在15～300 min的衍生化反应中,酪氨酸和苯丙氨酸衍生物的峰面积保持在非常稳定的水平上;而侧链含有羟基的丝氨酸和苏氨酸对衍生化时间特别敏感,衍生化时间超过15 min后,其衍生物的峰面积开始快速下降;当衍生化时间在15～60 min之内时,15种氨基酸中,只有酪氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、赖氨酸、亮氨酸、异亮氨酸和丙氨酸9种氨基酸的衍生物峰的面积下降幅度小于5％.结论 柱前衍生化时间对稻米氨基酸衍生物峰面积的检测值较为敏感,衍生化时间控制在15 min之内能有效减小实验误差.
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