马冠状病毒核衣壳蛋白基因片段的克隆及其表达

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根据NCBI发表ECV核衣壳基因序列,用PCR方法扩增出ECV核衣壳基因片段,插入表达型载体pGEX-6p-1中,构建重组质粒pGEX—ECV—N。以IFFG诱导表达,并用SDS—PAGE凝胶电泳分析,结果成功表达了42KDGST—ECV—N融合蛋白。将ECV—N从pGEX—ECV—N载体亚克隆到的杆状病毒转移载体pFastBacl,筛选出重组转移载体pFastBac—ECV.N,在DHIO细菌的转座子作用下,构建重组穿梭质粒Bacmid—ECV—N。提取正确重组的穿梭质粒DNA转染Sf9昆虫细胞,结果获
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