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目的构建人修复基因hMTH1反义RNA真核表达载体pEGFP-C1-T.方法提取人胚肺成纤维细胞(HLF)总RNA,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增hMTH1基因cDNA保守序列,经pGEM-T载体克隆后双酶切,将cDNA保守序列反向插入绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C1,构建hMTH1基因反义RNA真核表达载体pEGFP-C1-T,并转染细胞.用Western-blot法检验载体抑制hMTH1蛋白表达的效率.结果经RT-PCR获得423bp产物,T载体克隆后,经DNA测序,确定该片段为hMTH1基因cDNA,进而构建反义RNA真核表达载体pEGFP-C1-T,测序后确证.该载体转染细胞后,可使hMTH1蛋白水平 下降约46%.结论成功构建hMTH1基因反义RNA真核表达载体pEGFP-C1-T.