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目的
建立一种理想的体外海马神经元原代培养的实验方法。
方法取孕18 d的SD大鼠，分离体内胎鼠的海马后，经木瓜蛋白酶消化后接种，实验前用多聚赖氨酸铺板、采用无血清培养海马神经元，并采用免疫荧光进行神经元特异性标志物的鉴定；利用MTT比色法分析检测神经元细胞在不同处理方式下的成活率。
结果海马神经元生长状态良好，培养24 h后可形成突触，7～12 d可形成成熟的神经细胞网络，经NSE免疫荧光鉴定神经元纯度达95%以上。消化时采用木瓜蛋白酶比胰蛋白酶的细胞成活率明显增高(P<0.01)；采用口径1 mm枪头吹打细胞比口径0.5 mm和200目筛的细胞成活率高(P<0.01)。
结论该实验方式可获得高纯度的海马神经元细胞，并为一种简单易行的细胞培养方法。