【摘 要】
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目的通过建立自身免疫性心肌炎(EAM)大鼠模型，探讨小干扰RNA(siRNA)沉默CD40基因后对EAM大鼠外周血Th1/Th2与Th17/Treg平衡的影响。方法采用随机数字表法将Lewis大鼠分为正常对照组、EAM组、CD40siRNA治疗组及siRNA对照组。第0天和第7天，EAM组、CD40siRNA治疗组及siRNA对照组大鼠注射猪心肌肌球蛋白建立EAM模型。第7天，CD40siRNA治
【机 构】
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250000 济南，山东大学附属省立医院小儿心脏科,250000 济南，山东大学附属省立医院小儿心脏科,250000 济南，山东大学附属省立医院心脏超声科,250000 济南，山东大学附属省立医院小儿
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目的通过建立自身免疫性心肌炎(EAM)大鼠模型，探讨小干扰RNA(siRNA)沉默CD40基因后对EAM大鼠外周血Th1/Th2与Th17/Treg平衡的影响。
方法采用随机数字表法将Lewis大鼠分为正常对照组、EAM组、CD40siRNA治疗组及siRNA对照组。第0天和第7天，EAM组、CD40siRNA治疗组及siRNA对照组大鼠注射猪心肌肌球蛋白建立EAM模型。第7天，CD40siRNA治疗组大鼠予CD40siRNA治疗。观察各组大鼠基本情况，于第21天记录各组大鼠心电图及超声心动图后处死大鼠，观察心肌组织病理变化并计算病理学积分，应用ELISA法检测大鼠外周血干扰素(IFN)-γ、IL-4、IL-17及转化生长因子(TGF)-β水平。
结果1.EAM组、CD40siRNA治疗组及siRNA对照组大鼠EAM的总体发病率为100%，且在第0天至第21天均无死亡。2.正常对照组与CD40siRNA治疗组大鼠心电图均正常，EAM组与siRNA组大鼠仅2例出现期前收缩。3.EAM组、CD40siRNA治疗组及siRNA对照组大鼠超声心动图均异常，表现为左心室扩大、左心室壁肥厚、心肌动度减低、心功能明显降低、心包积液。CD40siRNA治疗组大鼠左心室短轴收缩率(LVFS)和左心室射血分数(LVEF)显著高于EAM组[(46.70±8.25)%比(34.28±11.81)%，(80.92±11.76)%比(64.03±12.60)%]，差异均有统计学意义(F＝0.652、0.234，P均<0.05)。4.EAM组、CD40siRNA治疗组及siRNA对照组大鼠心肌组织病理检查显示心肌纤维断裂、心肌细胞坏死及炎性细胞浸润。CD40siRNA治疗组心肌组织病理学积分明显低于EAM组(2.10±1.07比3.40±0.72)，差异有统计学意义(F＝1.290，P<0.05)。5.与正常对照组比较，EAM组大鼠外周血IFN-γ、IL-4、IL-17及TGF-β水平均显著升高[(1 245.55±244.56) ng/L比(501.53±18.93) ng/L，(78.03±10.47) ng/L比(30.77±1.74) ng/L，(80.82±13.33) ng/L比(27.98±3.01) ng/L，(156.27±12.11) ng/L比(4.33±0.79) ng/L]，差异均有统计学意义(t＝7.408、10.764、9.250、30.608，P均<0.05)，CD40siRNA治疗组大鼠外周血IFN-γ与IL-17水平较EAM组显著降低[(940.62±128.40) ng/L比(1 245.55±244.56) ng/L，(60.42±12.40) ng/L比(80.82±13.33) ng/L]，差异均有统计学意义(t＝2.704、2.745，P均<0.05)，IL-4与TGF-β水平显著升高[(97.91±13.62) ng/L比(78.03±10.47) ng/L，(178.84±12.10) ng/L比(156.27±12.11) ng/L]，差异均有统计学意义(t＝2.835、3.229，P均<0.05)。
结论CD40siRNA可明显减轻EAM大鼠心肌炎症，改善心功能，其机制可能与其降低Th1与Th17相关细胞因子水平，上调Th2与Treg相关细胞因子的水平，从而纠正Th1/Th2与Th17/Treg失衡有关。
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