【摘 要】
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目的 探讨RNA干扰质粒靶向沉默CXCR4基因表达,对人肝癌细胞增殖和侵袭作用的影响及其机制.方法 检测不同分化程度的肝癌细胞株CXCR4表达程度.将CXCR4干扰质粒转染肝癌细胞Hep
【机 构】
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西安市第四医院消化内科,西安,710042西安医学院附属医院消化病研究所,西安,710007;
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目的 探讨RNA干扰质粒靶向沉默CXCR4基因表达,对人肝癌细胞增殖和侵袭作用的影响及其机制.方法 检测不同分化程度的肝癌细胞株CXCR4表达程度.将CXCR4干扰质粒转染肝癌细胞HepG2,经G418筛选出稳定抑制细胞,使用Western blotting和Real time RT-PCR验证干扰质粒对CXCR4基因的靶向沉默效率.MTT法和Transwell小室试验检测CXCR4基因沉默后肝癌细胞的增殖能力和侵袭能力.Western blotting检测基质金属蛋白酶MMP-2和MMP-9蛋白表达水平,免疫荧光检测MMP-2在细胞内表达.结果 不同分化程度的肝癌细胞均有CXCR4表达,其中HepG2细胞表达最强.通过RNA干扰技术靶向沉默CXCR4基因,可高效、稳定地抑制CXCR4表达.CXCR4基因靶向沉默后明显抑制肝癌细胞增殖和侵袭.Western blotting提示CXCR4基因靶向沉默导致MMP-2蛋白表达明显下调.结论 CXCR4基因沉默可以抑制肝癌细胞增殖和侵袭,可能与其抑制侵袭相关分子MMP-2有关,提示CXCR4可能是肝癌治疗的一个有效靶点.
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