大鼠骨髓间充质干细胞来源微颗粒的提取及鉴定

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目的 分离并纯化SD大鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs),在此基础上收集骨髓间充质干细胞来源的微颗粒(bone mesenchymal stem cell-derived microparticles,BMSC-MPs),并对其进行鉴定.方法 采用全骨髓贴壁法分离纯化BMSCs,显微镜下观察BMSCs的形态,绘制第5代BMSCs的生长曲线,通过流式细胞术鉴定BMSCs的表面标记.通过血清饥饿法诱导BMSCs释放BMSC-MPs,流式细胞术鉴定BMSC-MPs的数量和表面标记.结果 分离的BMSC生长状态良好,呈梭形和典型的“鱼群样”分布,表面标记CD90和CD29阳性率分别为(99.81±0.94)%和(99.90±0.66)%,CD45和 CD34阳性率分别为(0.89±0.31)%和(1.79±0.33)%;流式细胞术鉴定BMSC-MPs数量为(2.55±0.86)×107个/mL,BMSC-MPs表面标记CD90和CD29阳性率分别为(97.46±1.85)%和(94.00±2.03)%,CD45和 CD34阳性率分别为(4.89±1.05)%和(1.81±0.33)%.结论 成功分离了大鼠BMSCs,在此基础上制备了 BMSC-MPs,并进行了初步鉴定,为后续研究BMSC-MPs的功能奠定了基础.
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