【摘 要】
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目的构建 pcDNA3.1-血管内皮细胞生长因子(VEGF)165质粒,观察其对兔骨缺损修复的影响。方法构建成重组真核表达质粒 pcDNA3.1-VEGF165;采用30只新西兰大白兔,制备双侧桡骨骨
【机 构】
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山东大学第二附属医院骨科; 山东大学第二附属医院整形外科; 山东大学第二医院分子实验室; 山东大学第二医院病理科;
【基金项目】
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山东省科技攻关计划资助项目(032050112);山东省自然科学基金(Q2006C08);山东省卫生厅科研 计划(2003)
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目的构建 pcDNA3.1-血管内皮细胞生长因子(VEGF)165质粒,观察其对兔骨缺损修复的影响。方法构建成重组真核表达质粒 pcDNA3.1-VEGF165;采用30只新西兰大白兔,制备双侧桡骨骨缺损模型,实验组以体积等大的明胶海绵置于创腔,局部直接注射稀释的质粒液200 ng;对照组以同量生理盐水代替质粒液,同法处理。于术后1、2、4、6、8和12周行 X 线照片后获取标本,观察缺损局部组织修复及新生血管并计算微血管密度(MVD)。结果 pcDNA3.1-VEGF165质粒构建成功,测序正确。术后 X 线:1周时两组无明显差别,实验组2周骨痂形成、骨质修复,12周时骨质已正常,对照组表现为修复迟缓;HE 染色:实验组2周大量新生血管形成、通血,4周成骨细胞大量增殖、骨小梁形成,12周骨皮质改建完成,骨髓腔再通;对照组经历过程类似,但相对时间延迟,12周时骨髓腔及皮质改建尚未完成。2周时对照组及实验组 MVD 分别为56.1±6.1、69.1±5.4,均较1周时42.2±6.4、47.0±7.5时增加,组间及组内间差异有统计学意义(t=8.0347,P=0.0000)。结论骨缺损局部直接应用 PcDNA3.1-VEGF165质粒液后,可表达并上调 VEGF165,具有促进局部微血管形成、加快骨缺损修复的作用。
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