【摘 要】
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构建和表达人FGF2K18S/S69C突变体,并筛选最佳的表达条件。对GenBank数据库FGF2序列进行分析后,发现了位于第18位和第69位的氨基酸定向突变之后,能够增加FGF2稳定性。基因合成FGF2K18S/S69C突变体,与载体pET3c连接后转化至大肠杆菌BL21中,用乳糖诱导,以蛋白质表达量为指标,考察诱导剂浓度、装液体积、诱导时机、时间和温度对表达量的影响。成功构建pET3c-FGF2K18S/S69C突变体重组质粒,经菌落P
【机 构】
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吉林医药学院检验学院,吉林医药学院吉林省抗体工程创新中心
【基金项目】
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吉林省教育厅项目(JJKH20180822KJ),吉林省科技厅项目(20180623045TC),吉林省大学生创新创业训练项目(201813743007)共同资助。
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构建和表达人FGF2K18S/S69C突变体,并筛选最佳的表达条件。对GenBank数据库FGF2序列进行分析后,发现了位于第18位和第69位的氨基酸定向突变之后,能够增加FGF2稳定性。基因合成FGF2K18S/S69C突变体,与载体pET3c连接后转化至大肠杆菌BL21中,用乳糖诱导,以蛋白质表达量为指标,考察诱导剂浓度、装液体积、诱导时机、时间和温度对表达量的影响。成功构建pET3c-FGF2K18S/S69C突变体重组质粒,经菌落P
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