荧光原位杂交技术分析大剂量照射后Calyculin A诱导的早熟凝集染色体

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目的

探索用荧光原位杂交(FISH)技术分析大剂量照射后Calyculin A(CA)诱导的早熟凝集染色体的可行性。

方法

采用X射线照射离体外周血,吸收剂量为0、1、5、10、15和20 Gy。RPMI 1640培养基培养,CA诱导染色体早熟凝集,1、4号全染色体探针荧光原位杂交,荧光显微镜下观察,计数畸变阳性细胞数及两条染色体断片数,拟合剂量效应曲线。

结果

以阳性细胞作为观察对象,剂量范围在0~15 Gy时,阳性细胞数和照射剂量呈现良好的剂量-效应关系,Y=0.008+0.065D+1.858×10–5D2(R2=0.994)。以断片数作为观察对象,剂量范围在0~20 Gy时,同样呈现良好的剂量-效应关系:Y=–0.032+0.216D–0.01D2(R2=1.0)。

结论

用FISH分析CA诱导的早熟凝集染色体,可用于估算大剂量照射后的生物剂量。

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