【摘 要】
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目的 探讨甲胎蛋白(AFP)对耐药基因MDR1表达和肝癌细胞化疗敏感性的影响.方法 建立稳定表达AFP的肝癌细胞系SMMC-7721/AFP,分别通过Real-time PCR和蛋白印迹检测转染前后AFP
【机 构】
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276600,山东省莒南县人民医院普外科华中科技大学同济医学院附属梨园医院放射科;276600,山东省莒南县人民医院消化科;华中科技大学同济医学院附属梨园医院肿瘤科;黄冈市中心医院普外科;华中科技大学
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目的 探讨甲胎蛋白(AFP)对耐药基因MDR1表达和肝癌细胞化疗敏感性的影响.方法 建立稳定表达AFP的肝癌细胞系SMMC-7721/AFP,分别通过Real-time PCR和蛋白印迹检测转染前后AFP和MDR1的表达.MTT法测定SMMC-7721/AFP和SMMC-7721/EGFP细胞对阿霉素的化疗敏感性.siRNA沉默SMMC-7721/AFP细胞中MDR1的表达,观察细胞对阿霉素化疗敏感性的变化.采用免疫组织化学染色法检测60例肝癌组织中MDR1编码蛋白PgP的表达,分析Pgp表达与血清AFP水平的相关性.结果 在SMMC-7721/AFP细胞能检测到AFP mRNA和蛋白表达,而对照细胞则未检测到AFP表达,表明AFP稳转细胞系构建成功.SMMC-7721/AFP细胞中MDRl mRNA和蛋白水平明显高于对照细胞,SMMC-7721/EGFP和SMMC-7721/AFP细胞MDRl mRNA水平为对照组的(52.7±1.5)倍(P＜0.05).SMMC-7721/AFP细胞对阿霉素的耐药性增加了(12.8±1.1)倍(P＜0.05).siRNA沉默SMMC-7721/AFP细胞中MDR1的表达后细胞对阿霉素的化疗敏感性明显增强.肝癌组织中Pgp的表达和血清AFP水平呈正相关.结论 AFP可通过上调MDR1的表达引起肝癌细胞对阿霉素耐药.
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