【摘 要】
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为了大规模生产重组B型流感疫苗候选株rIBV，本研究探索了rIBV在无血清MDCKs细胞上的最佳培养条件，再扩大到生物反应器中优化工艺参数，经过连续传代15代后测定了MDCKs细胞源毒种rIBV的遗传稳定性和病毒滴度。通过对病毒培养条件进行优化，我们确定了rIBV在MDCKs细胞上增殖的最佳培养条件是TOI为72 h、MOI=0.001、CCI为4.0×10~6 cells/mL、TPCK胰酶浓度
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为了大规模生产重组B型流感疫苗候选株rIBV，本研究探索了rIBV在无血清MDCKs细胞上的最佳培养条件，再扩大到生物反应器中优化工艺参数，经过连续传代15代后测定了MDCKs细胞源毒种rIBV的遗传稳定性和病毒滴度。通过对病毒培养条件进行优化，我们确定了rIBV在MDCKs细胞上增殖的最佳培养条件是TOI为72 h、MOI=0.001、CCI为4.0×10~6 cells/mL、TPCK胰酶浓度为2μg/mL、50%DO和pH=7.2±0.5。rIBV在MDCKs细胞上连续传代15代后仍然具有高度遗传稳定性。相比于鸡胚源rIBV株，适应MDCKs细胞生长15代后rIBV株的EID50由106.25/mL提高至109.5/mL,TCID50由104.5/mL提高至108.25/mL。本研究对重组B型流感疫苗候选株rIBV在MDCKs细胞上的培养工艺进行了优化，获得一株具有高感染力和高病毒滴度的MDCKs细胞源疫苗候选株rIBV，为下游流感疫苗生产及纯化工艺奠定了基础。
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