荚膜红细菌十聚异戊二烯焦磷酸合成酶异源表达及纯化的研究

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目的 构建生产辅酶Q10的大肠杆菌基因工程菌并研究相关酶的表达情况。方法 将荚膜红细菌(Rhodobacter capsulatus B10)中十聚异戊二烯焦磷酸合成酶编码基因ddsA分别克隆在Lac,T7和Trc启动子下游,使其在Escherichia coli JM83中表达。同时利用His-tag的表达系统,对该酶的融合表达和镍柱纯化条件进行了研究。结果 产物分析发现该基因在Ecoli中表达出有活性的十聚异戊二烯焦磷酸合成酶,并使宿主产生辅酶Q10。同时,28℃培养过夜,该酶以可溶形式存在于上清液中
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