MiR-200a通过靶向硫酸酯酶2基因抑制非小细胞肺癌细胞A549迁移

来源 :中华胸心血管外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:NC330201
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目的

研究微小RNA-200a(miR-200a)对非小细胞肺癌细胞迁移的影响,探讨其分子机制。

方法

采用Real-time PCR法检测人肺癌细胞株(A549、SK-MES-1)及人正常肺支气管上皮细胞株16HBE中miR-200a的表达水平。将hsa-miR-200a mimics、NC mimics、hsa-miR-200a inhibitor、NC inhibitor分别瞬时转染A549细胞后,transwell小室法检测细胞迁移能力的变化。利用生物信息学软件预测miR-200a的可能靶基因,通过荧光素酶报告基因检测系统和Western blot法对预测的潜在靶基因进行验证。

结果

miR-200a在肺癌细胞系A549、SK-MES-1中表达明显降低(P<0.05)。过表达miR-200a明显抑制A549肺癌细胞的迁移能力,而将pCDNA.3-Sulf2质粒与hsa-miR-200a共转染A549细胞可以回复其迁移能力(P< 0.01)。双荧光素酶报告基因显示miR-200a可以直接作用于靶基因硫酸酯酶2(Sulfatase 2,Sulf2)的3'-UTR区域抑制荧光素酶活性,Western blot检测显示上调miR-200a的表达能够明显下调A549肺癌细胞Sulf2蛋白的表达水平。

结论

miR-200a通过靶向作用于Sulf2基因来抑制肺癌细胞的迁移能力。

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