H3N8亚型马流感病毒HA1基因原核表达载体的构建及表达

来源 :新疆农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong602
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采用RT—PCR方法从马流感病毒中国分离株A/马/新疆/07(H3N8)中扩增的HAl基因片段,将其克隆刽表达载体pET=28a(+)中,测序正确后转化入Rosetta(DE3)中进行IPTG诱导表达。结果表明,重组菌表达出约53ku,以沉淀性形式存在的重组蛋白,且在37℃,0.4mmol/LIPTG条件下诱导8h表达效果最好。表达产物经切胶纯化后得到纯度较高的目的蛋白。经Western-blot分析,表达的蛋白与抗马流感病毒阳性血清发生特异性反应,证实该蛋白具有良好的反应原性。
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